Biotechnologie 2

Sekundärmetabolite

Benennen Sie vier molekularbiologische/epigenetische Strategien um die Bildung von Sekundärmetaboliten unter Laborbedingungen anzuregen und beschreiben Sie eine davon im Detail.

  1. „klassisch“ Inaktivierung eines Biosynthesegens (Gen-Deletion), kombiniert mit einer metabolischen Profilanalyse der Mutante und des Wildtyps
  2. Durch (heterologe) Überexpression von Genen unter Verwendung von definierten Promotoren, oder durch Promotoraustausch in SM-Biosynthesegenen
  3. Durch Überexpression von Pathway- spezifischen regulatorischen Genen, die in vielen SM-verwandten Genclustern vorhanden sind
  4. Durch die Manipulation pleiotroper Regulatoren der SM-Synthese und / oder den Einsatz von epigenetisch basierten Methoden
Zu 2:
2 Strategien
  • Überexpression von Transkriptionsfaktoren unter einem bekannten Promotor (a)
  • Direkt Promotor der PKS/NRPS ausgetauscht mit definiertem Promotor, von dem man Regulation genau kennt (b)

Strategie a oft zielführender, da Cluster oft mehrere Promotoren besitzen, die vom selben TF gesteuert werden.

(Anm. PalcA = Promotor der Alkoholdehydrogenase, induziert durch Alkohol)

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