Biotechnologie 2

Rek. Proteinproduktion

Was wissen sie über die Proteinproduktion in transgenen Tieren?

DNA wird unter die Expressionssignale eines Milchproteins kloniert und Protein wird daher spezifisch in die Milch abgegeben (Reinigung). Konzept: Impfung per Milch oder Nährstoffanreicherung etc.
 
Transgene Tiere:
  • Jede Zelle trägt die neue genetische Information
    • Genetische Information wird via Keimbahn eingeschleust und nicht in die somatischen Zellen wie bei der Gentherapie
  • Weitergabe der genetischen Information an Nachkommen
  • Transgene = Gene die aus anderen Organismen stammen
  • Häufigste Modifikation: Verwendung von geeigneteren Promotor-Transgenen für Regulation
 
Erzeugen transgener Tiere:
  • Mikroinjektion in die befruchtete Eizelle
    • Vor Verschmelzung der Vorkerne
    • Während erster Teilungen in Zellkultur aufbewahrt
    • Implantation in Uterus eines weiblichen Tieres
    • Tiere mit stabilen Transgenen = Gründertiere
  • Genkanone
  • Transformation von Spermien
  • Embryonale Stammzelltechnik
    • Entstammen der Blastocyste, einem sehr frühen Embryonalstadium
    • Einbau von DNA in die kultivierten embryonalen Stammzellen
    • Es entstehen genetische Chimären --> bestehend teils aus transgenen und teils normalem Gewebe
  • Retrovirale Vektoren
    • Infektion von Zellen früher Embryonalstadien, z.B. embryonale Stammzellen
    • Vorteil: nur eine einzelne Kopie des Retrovirus puls Transgen wird im Genom eingebaut
      • Befrchtete Eizelle wird mit Retrovirus und Transgenkonstrukt infiziert
      • Transplantiert in ein scheinschwangeres Tier
    • Nachteil: Virus-DNA wird mit eingebaut
    • Nachteil: Tiere sind stets Chimäre, da der Einbau des Virus nicht genau zum zeitpunkt der Verschmelzung der Kerne erfolgt!
    • Selten Eingesetzt, wenn man vollständig transgene Tiere erzeugen möchte,
 
Produkte:
  • Ziege:
    • Monoklonale AK
    • Antithrombin III
  • Schafe:
    • Faktor IX
    • Fibrinogen
  • Rinder:
    • Human Serum albumin

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