Biotechnologie 2

Rek. Proteinproduktion

Wie wurde P. pastoris verändert, damit die Glykosylierung der humanen ähnlich ist?

  • Ziel: die N-Glykosylierung ident der humanen Glykosylierung zu machen, damit sie z.B. vom Immunsystem nicht erkannt wird.
  • Niedere Eukaryonten haben aber generell anderen Glykosylierungtyp wie der Mensch. Häufig werden nur Mannosen angehängt (High Mannose Typ) während Mensch einen Komplexen Glykan Typ hat.
 
 
Daher wurden in Pichia und anderen Hefen/Pilzen:
  • zusätzliche Transferasen ins Genom eingebaut: GnTI+ II + Gal + SialT: N-Acetylglucosamin/Galactose/Sialylsäure-Transferasen.
  • Ausschaltung von Mannosyltransferasen: Δoch1 (outer chain elongation) sowie Δalg3 (asparagine-linked glycosylation).

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