Klassische Genetik, Grundbegriffe

Weiler Nover, Gentechnik und DNA Sequenzierung

wie gewinnt man aus einer Bakterienkultur Plasmid DNA?
 

Durch Transformation von Bakterien (E.coli, idR) wird das Plasmid mit eingebautem DNA-Abschnitt in den Bakterienzellen unabhängig von der chromosomalen DNA reliziert.
 
kultiviert man die bakterien in gegenwart von Ampicillin, so überleben nur die plasmidhaltigen Zellen
 
nun werden die Plasmide aus den bakterien isoliert
 
und die klonierten, nunmehr in großer Zahl vorliegenden DNA-Abschnitte können weiterverarbeitet werden
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nach transformation werden die bakterien so verdünnt ausplattiert , dass sie als Einzelkolonien auf Nährboden mit Ampicillin wachsen
 
aus jeder Einzelkolonie kann man einen best. Produktvektor mit eiem best. Genfragment isolieren
 

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