Klassische Genetik, Grundbegriffe

Weiler Nover, Pflztransformation und transgene Pfzen

Floral-dip-Methode

der ganze junge Blütenstand wird mit noch geschlossenen Knospen kurzzeitig in eine Suspension der Agrobacterien getaucht
 
  • Transfer der T-DNA kann direkt in den Eipparat erfolgen
  • erhalten im positiven Fall bereits den transgenen Embryo im reifen Samen
  • von allen geernteten Samen eine so behandelten Arabisdopsis Plfanze können  bis zu 1% transgen sein
 
zur Selektion:
  • Die keimlinge werden angezogen ind dann mit dem Selektionsagens (Herbizid Phosphinotricin (BASTA)) besprüht
  • die wenigen transgenen Keimlinge überleben
  • Wildtypkeimlinge können sich nicht weiterentwickeln
 
Resistenz beruht auf:
  • der Entgiftung des Phosphinotricins durch Acetylierung
Resistenzmarker:
  • benutzte: PAT-Gen
  • codiert für de Expression von Phosphinotricin-Acetyltransferase
 
 
 
noch besere Methode zur herstellung transgener flanzen
 
--> bei Pflanzen die zahlreiche meist sehr kleine Samen bilden
(Arabidopsis , Kartoff

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