Biotechnologie 2

Rek. Proteinproduktion, 2017-11-23

Beschreiben sie das Gluthation S Transferasesystem zur Proteinreinigung?

Für Affinitätschromatographie:
  • Glutathion-S-Transferasen haben eine hohe Affinität für Glutathion
  • Verwendung als Fusionsprotein/Protein-Tags
  • auf pGEX Vektoren
 
System besteht aus:
  • Synthetischer tac Promotor (Hybridpromotor zw. lac und trp Promotor)

  • Strukturgen der Glutathion S-transferase (aus Schistosoma japonicum)

  • Sequenz für enzymatische Spaltung des Fusionsproteins mit Proteasen (zB Thrombin)

  • MCS für Einbringung des Fremdgens

  • Zusätzliche Kopie des Lac Repressors

  • Antikörper gegen GST + Reinigung über Glutathion Sepharose

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