Biotechnologie 2

Rek. Proteinproduktion

Erklären sie den Begriff Inclusion Body, mögliche Ursachen für die Bildung, Vor und Nachteile.

Bildung von Proteinakkumulationen im Cytoplasma, tw auch Periplasma.
  • Einschlusskörper
  • Inclusion oder refractile Bodies
  • Grösse 0.5–1.3 μm
  • amorph bis parakristallin
 
  • Sehr hohe lokale Konzentrationen eines rekomb. Proteins das nur teilgefaltet ist im Cytoplasma (kann aber aktiv sein).
  • Hydrophobe Teile des Proteins, die sich normal im Inneren befinden, liegen außen.
  • Zu geringer Level von Faltungsenzymen, Chaperones oder Foldasen.
  • Verhinderung der Disulfidbrückenbildung (reduzierende Umfeld des Cytoplasma)
  • Fehlen der richtigen posttranslational modifizierenden Enzyme (v.a. bei eukaryontischen) führt zu weniger stabilen heterologen Protein.
 
Kann auch Vorteil sein: leichtere Reinigung der IB gg den restlichen Proteinen.  Richtiges Refolding wichtig um native Konformation einzunehmen (Disulfidbrücken etc).
 
Nachteil: Refolding notwendig


Inclusion Body

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