Biotechnologie 2

Rek. Proteinproduktion

Welche Möglichkeiten gibt es den Fusionpartner in der rek. Proteinexpression abzuspalten?

  • Proteasespaltungstelle:
    Zur Abtrennung des Fusionsproteins befindet sich auf vielen Expressionsvektor mit einem Fusionsprotein auch oft die Erkennungsstelle für eine Protease (Thrombin, Faktor Xa, Enterokinase).
  • Chemische Spaltung 
    auch häufig verwendet
  • Autoproteolyse (zB Npro)
    • Fusionstechnologie (Virale Autoprotease)
    • Es entsteht authentischer N-Terminus des Proteins
    • Siehe Abbildung
  • Inteine:
    Proteinteil der sich autokatalytisch aus diesem ausschneiden und die Exteine durch Peptidbindung verknüpfen kann.
 

Autoprotolyse mit Npro

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