Biotechnologie 2
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Rek. Proteinproduktion

Was versteht man unter einem Promotor bei Bakterien? Welche generelle Eigenschaften sind bei der Proteinproduktion vom Vorteil?

 Promotor
  • Regulatorische Sequenz, verantwortlich für die Wechselwirkung mit Transkriptionsfaktoren, die den Transkriptionsstart durch RNA Polymerase vermitteln.

  • Prokaryontischer Promotor befindet sich ca 10-100 Nukleotide upstream der Ribosomenbindungsstelle, haben einheitliche Struktur (im Ggs. zu Eukaryonten).
  • Aufgrund der Regulation werden induzierbare, reprimierbare und konstitutive Promotoren unterschieden.
 
  • Eigenschaften des “idealen” Promotors zur Proteinproduktion:
    • Stärke: Produkt kann bis zu 50% des Gesamtproteins ausmachen.
      Ziel: Starke Expression, hohe Produktion ohne Nachteile

    • Leicht induzierbar (reprimierbar), billiger Inducer.

    • Sehr schwacher basaler Expressionslevel im nicht induzierten Zustand: verhindert mögliche Produkttoxizität oder Selektionsnachteil in der Wachstumsphase der Fermentation.
      --> Nicht Leaky
    • Stabil und gut regulierbar um starke Trennung zwischen Wachstums- und Produktionsphase zu ermöglichen; Stämme haben sonst einen selektiven Nachteil, da viel Energie in die Proteinproduktion gesteckt wird und weniger Biomasse gebildet werden kann

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