Welche allgemeinen E. coli Produktionsstämme kennen Sie, welche (genetische) Veränderung sind in den Stämmen vorhanden? Was bedeutet die Abkürzung DE3 und warum ist das für die Proteinproduktion wichtig?

Question

Answer 1

E. coli BL21:
- sind Protease (lon and ompT) arm
- am häufigsten verwendet.
BL21(DE3):
- stammt vom BL21 ab (ebenfalls lon und ompT-arm)
- besitzt T7 RNA Polymerase Gen unter Kontrolle des lacUV5 Promotors, auf einem Phagengenom ins Bakterienchromosom insertiert.
- Insertion dieses λDE3 Lysogen führt zum BL21(DE3).
- Durch induzierbares T7 RNAP Gen für die Proteinproduktion mit T7 Promotoren geeignet
- Ausgangstamm BL21 nur für die Expression mit lac Promotoren.
Tuner:
- gleichmässige Aufnahme von IPTG (lacYZ Mutation) --> erleichtert Regulation.
Origami:
- Mutationen in Thioredoxinreduktase (trxB) und Glutathionreduktase (gor) --> Verbessert Disulfidbrückenbildung im Cytoplasma.
Rosetta™
- Expression versch. tRNAs für selten verwendete Codons.
BL21 (DE3) CodonPlus-RIL
- Expression von tRNAs für seltene Codons von Arginin, Isoleucin und Leucin
BL21 (DE3) CodonPlus-RP
- Expression von tRNAs für seltene Codons von Arginin und Prolin

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